缓冲液参考中心
缓冲液参考中心
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常见生物缓冲液的pH范围
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Tris缓冲液的制备 - pH vs. 温度
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磷酸盐缓冲液的制备 - 0.2M溶液
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柠檬酸 - 磷酸氢╳二钠缓冲液的配置,pH2.6 - 7.6
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柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液的配置,pH3.0 - 6.2
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乙酸钠 - 醋酸缓冲液的配置,pH3.7 - 5.6
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磷酸氢︾二钠√ - 磷酸二氢钠缓冲液的配置,pH5.8 - 8.0 (25℃)
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咪唑 - 盐酸盐缓冲液的∏配置,pH6.2 - 7.8 (25℃)
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碳酸钠 - 碳酸氢钠缓冲液的配置,pH6.2 - 7.8 (25℃)
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缓冲■液配置公式
选择正确的缓冲液
基于酸∑碱性、解离常数(衡量溶液「酸碱性、浓度←以及温度的系数)、规格、纯度以及精确的应用领域可帮助您选择一款合适的缓冲液。以下表格通过pH与pKa数据的参考,为您提供一些常用缓冲液的配置方案。
缓冲☆液级别
为满足各种形式的实验需求,我们提供不同纯度与杂质含量的缓冲液试剂。目前有7种不同级别的试剂可以满足基本的实验室需求、帮助建立药品配方与生产⌒、检测痕量金属含量以及生产指定纯度级别的材料。
常用生物缓冲的有效pH范围(25℃, 0.1M)
TRIS缓冲液配置指导 - pH vs.温度
pH 在不同温度下的变化 |
|
|
g/L 0.5M溶液 |
|
5℃ |
25℃ |
37℃ |
Tris-HCl |
Tris base |
7.76 |
7.2 |
6.91 |
7.02 |
0.67 |
7.89 |
7.3 |
7.02 |
6.85 |
0.8 |
7.97 |
7.4 |
7.12 |
6.61 |
0.97 |
8.07 |
7.5 |
7.22 |
6.35 |
1.18 |
8.18 |
7.6 |
7.3 |
6.06 |
1.39 |
8.26 |
7.7 |
7.4 |
5.72 |
1.66 |
8.37 |
7.8 |
7.52 |
5.32 |
1.97 |
8.48 |
7.9 |
7.62 |
4.88 |
2.3 |
8.58 |
8 |
7.71 |
4.44 |
2.65 |
8.68 |
8.1 |
7.8 |
4.02 |
2.97 |
8.78 |
8.2 |
7.91 |
3.54 |
3.34 |
8.88 |
8.3 |
8.01 |
3.07 |
3.7 |
8.98 |
8.4 |
8.1 |
2.64 |
4.03 |
9.09 |
8.5 |
8.22 |
2.21 |
4.36 |
9.18 |
8.6 |
8.31 |
1.83 |
4.65 |
9.28 |
8.7 |
8.42 |
1.5 |
4.9 |
9.36 |
8.8 |
8.51 |
1.23 |
5.13 |
9.47 |
8.9 |
8.62 |
0.96 |
5.32 |
9.56 |
9 |
8.7 |
0.76 |
5.47 |
|
磷酸盐缓冲液配置指导 - 0.2M 溶液
磷酸二氢钾无水物 g/L |
磷酸氢二钠七水合物 |
23℃ pH |
磷酸二氢钾无水物 g/L |
磷酸氢二钠七水合物 |
23℃ pH |
22.4 |
3.49 |
5.7 |
10.8 |
29.51 |
6.9 |
22.08 |
4.29 |
5.8 |
9.36 |
32.73 |
7 |
21.6 |
5.37 |
5.9 |
7.92 |
35.95 |
7.1 |
21.05 |
6.6 |
6 |
6.72 |
38.63 |
7.2 |
20.4 |
8.05 |
6.1 |
5.52 |
41.31 |
7.3 |
19.56 |
9.93 |
6.2 |
4.56 |
43.46 |
7.4 |
18.6 |
12.07 |
6.3 |
3.84 |
45.07 |
7.5 |
17.64 |
14.22 |
6.4 |
3.12 |
46.68 |
7.6 |
16.44 |
16.9 |
6.5 |
2.52 |
48.55 |
7.7 |
15 |
20.12 |
6.6 |
2.04 |
49.09 |
7.8 |
13.56 |
23.34 |
6.7 |
1.68 |
49.89 |
7.9 |
12.24 |
26.29 |
6.8 |
1.27 |
50.81 |
8 |
|
醋酸-磷酸氢∴二钠缓冲液配置,pH 2.6-7.6
一水柠檬酸,C6H8O7 ? H2O,MW 210.14;0.1M 含量为21.01 g/L。磷酸氢二钠,MW 141.98; 0.2M 含量为28.40 g/L,或者磷酸氢二钠二水合物,MW 178.05;0.2M 含量为35.61 g/L。
当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.2M-磷酸氢二钠混合时
pH |
X mL 0.1M-醋酸 |
Y mL 0.2M-碳酸氢二钠 |
2.6 |
89.1 |
10.9 |
2.8 |
84.15 |
15.85 |
3 |
79.45 |
20.55 |
3.2 |
75.3 |
24.7 |
3.4 |
71.5 |
28.5 |
3.6 |
67.8 |
32.2 |
3.8 |
64.5 |
35.5 |
4 |
61.45 |
38.55 |
4.2 |
58.6 |
41.4 |
4.4 |
55.9 |
44.1 |
4.6 |
53.25 |
46.75 |
4.8 |
50.7 |
49.3 |
5 |
48.5 |
51.5 |
5.2 |
46.4 |
53.6 |
5.4 |
44.25 |
55.75 |
5.6 |
42 |
58 |
5.8 |
39.55 |
60.45 |
6 |
36.85 |
63.15 |
6.2 |
33.9 |
66.1 |
6.4 |
30.75 |
69.25 |
6.6 |
27.25 |
72.75 |
6.8 |
22.75 |
77.25 |
7 |
17.65 |
82.35 |
7.2 |
13.05 |
86.95 |
7.4 |
9.15 |
90.85 |
7.6 |
6.35 |
93.65 |
|
醋酸-柠檬酸钠缓冲液配置,PH 3.0-6.2
一水柠檬酸,C6H8O7 ? H2O,MW 210.14;0.1M 含量为21.01 g/L。柠檬酸三钠二水合物,C6H5O7Na3?2H2O,MW 294.12;0.1M 含量为29.41 g/L。
当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.1M-柠檬酸三钠混合时
pH |
X mL 0.1M-醋酸 |
Y mL 0.1M-柠檬酸三钠 |
3 |
82 |
18 |
3.2 |
77.5 |
22.5 |
3.4 |
73 |
27 |
3.6 |
68.5 |
31.5 |
3.8 |
63.5 |
36.5 |
4 |
59 |
41 |
4.2 |
54 |
46 |
4.4 |
49.5 |
50.5 |
4.6 |
44.5 |
55.5 |
4.8 |
40 |
60 |
5 |
35 |
65 |
5.2 |
30.5 |
69.5 |
5.4 |
25.5 |
74.5 |
5.6 |
21 |
79 |
5.8 |
16 |
84 |
6 |
11.5 |
88.5 |
6.2 |
8 |
92 |
|
醋酸钠-醋酸缓冲液配置,PH 3.7 - 5.6
醋酸钠,CH3COONa ? 3H2O,MW 136.09;0.2M 含量为27.22 g/L。
X mL 0.2M-NaOAc 和Y mL 0.2M-HOAc 混合时
pH,18℃ |
X mL 0.2M-醋酸钠 |
Y mL 0.2M-冰醋酸 |
3.7 |
10 |
90 |
3.8 |
12 |
88 |
4 |
18 |
82 |
4.2 |
26.5 |
73.5 |
4.4 |
37 |
63 |
4.6 |
49 |
51 |
4.8 |
59 |
41 |
5 |
70 |
30 |
5.2 |
79 |
21 |
5.4 |
86 |
14 |
5.6 |
91 |
9 |
|
碳酸氢二钠-碳酸二氢钠缓冲液配置,PH 5.8-8.0 25℃
Na2HPO4 ? 2H2O, MW 178.05;0.2M 含量为35.61 g/L。Na2HPO4 ? 12H2O,MW 358.22; 0.2M 含量为71.64 g/L。NaH2PO4 ? H2O,MW 138.01;0.2M 含量为27.6 g/L。NaH2PO4 ? 2H2O,MW 156.03;0.2M 含量为31.21 g/L。
X mL 0.2M-磷酸氢二钠,Y mL 0.2M-磷酸二氢钠;用水稀释至100mL
pH,25℃ |
X mL 0.2M-磷酸氢二钠 |
Y mL 0.2M-磷酸二氢钠 |
5.8 |
4 |
46 |
6 |
6.15 |
43.85 |
6.2 |
9.25 |
40.75 |
6.4 |
13.25 |
36.75 |
6.6 |
18.75 |
31.25 |
6.8 |
24.5 |
25.5 |
7 |
30.5 |
19.5 |
7.2 |
36 |
14 |
7.4 |
40.5 |
9.5 |
7.6 |
43.5 |
6.5 |
7.8 |
45.75 |
4.25 |
8 |
47.35 |
2.65 |
|
咪唑-HCl 缓冲液配置,PH 6.2 - 7.8 25℃
咪唑,C3H4N2,MW 68.08
25mL 0.2M-咪唑(13.62 g/L),X mL 0.2M-HCl,用水稀释至100mL
pH, 25℃ |
X mL 0.2M-HCl |
6.2 |
21.45 |
6.4 |
19.9 |
6.6 |
17.75 |
6.8 |
15.2 |
7 |
12.15 |
7.2 |
9.3 |
7.4 |
6.8 |
7.6 |
4.65 |
7.8 |
3 |
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碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液配置,PH 9.2 -10.8
Na2CO3 ? 10H2O,MW 286.2;0.1M 含量为28.62 g/L。NaHCO3, MW 84.0;0.1M 含量为8.40 g/L。
X mL 0.1M-碳酸钠和Y mL 0.1M-碳酸氢钠混合时
20℃ |
37℃ |
X mL 0.1M-碳酸钠 |
Y mL 0.1M-碳酸氢钠 |
9.2 |
8.8 |
9.4 |
9.1 |
9.5 |
9.4 |
9.8 |
9.5 |
9.9 |
9.7 |
10.1 |
9.9 |
10.3 |
10.1 |
10.5 |
10.3 |
10.8 |
10.6 |
|
缓冲液制备的配方与方式
质量分数(w/v)
(缓冲液所需百〇分比/100)× 最终缓冲液体积(mL)= 最初所需原料的质量(g)
配置摩尔浓度
所需的物质的量浓度 × 分子量 × 溶液最终体积(L) = 所需的质量(g)
亨德森-哈塞尔巴尔赫方◥程
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